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分子生物學實驗室

基因擴增實驗室(PCR實驗室):

    PCR是分子生物學研究和實驗的常規方法,并沒有嚴格的凈化要求,但是為了避免各個試驗區域間交叉污染的可能性,宜采用全送全排式氣流組織形式。同時,要嚴格控制送、排風的比例以保證各實驗區的壓力要求。

試劑貯存和準備區:

    該實驗區主要進行的操作作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應混合液的制備。試劑和用于標本制作的材料應直接運送至該區,不得經過其它區域。試劑原材料必須貯存在本區內,并在本區內制備成所需的貯存試劑。對氣流壓力的控制,本區并沒有嚴格的要求。

標本制備區:

    該區域主要進行的操作為臨床標本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增反應管和測定RNA時cDNA的合成。本區的壓力梯度要求為相對于臨近區域為正壓,以避免從鄰近區域進入本區的氣溶膠污染。另外,由于在加樣操作中可能會發生氣溶膠所致的污染,所以應避免在本區域內不必要的走動。

擴增反應混合物配制和擴增區:

    擴增反應混合物配制和擴增區:該區域主要進行的操作為NDA或cDNA擴增。此外,已制備的DNA模板和合成的cDNA(來自樣本制備區)的加入和主反應混合液(來自試劑貯存和制備區)制備成反應混合液等也可以在本區域內進行。在巢氏PCR測定中,通常在第一輪擴增后必須打開反應管。因此巢氏擴增有較高的污染危險性,第二次加樣必須在本區域內進行。本區的壓力梯度要求為:相對于鄰近區域為負壓,以避免氣溶膠從本區域漏出。為避免氣溶膠所致的污染,應盡量減少在本區內不必要的走動。個別操作如加樣等應在超凈臺內進行。

擴增產物分析區:

    該區域主要進行的操作為擴增片段的測定。如使用全自動封閉分析儀器檢測,此區域可不設。本區是最主要的擴增產物污染來源,因此對本區的壓力梯度的要求為:相對于臨近區域為負壓,以避免擴增產物從本區域擴散至其它區域。

完備的實驗室配套設施:

    完備的實驗室配套設施是保證實驗工作的必要條件,應根據各個實驗室實驗內容的不同配備相應的設備和儀器,如超凈工作臺、生物安全柜、離心機、加樣器等。


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